logo 外周PBMC分离操作记录 文件编码: SOP-SC-011-E01
版 本 号: 01
工序: 外周血PBMC分离 记录编号  
细胞批号   日期  
试剂 名称 生产厂家 批号 使用数量
外周血 /    
生理盐水      
淋巴细胞分离液      
仪器
设备
生物安全柜:  XW015  XW022  其他  
离心机:  XW016  XW026  其他  
外周血
PBMC分离

1. 样本来源: 接收的外周血物料编码 . 采集时间:  24h内  超过24h; 入库编码:  ;

2. 紫外灯照射30min;

3. 血液总量 mL, 分成  个50mL离心管进行处理;

4. 使用离心机(  XW016  XW026 )650·g, 5 min, 升9降9, 结束后收集上清, 56℃水浴30min, 使用离心机(  XW016  XW026 )3000·g, 10 min, 取上清-20℃保存.

5. 用生理盐水将下层溶液补至50mL;

6. 铺血: 将混匀并稀释的外周血缓慢并小心地加到提前准备好的  mL,  管分离液中.

7. 离心机(  XW016  XW026 )1200·g, 25 min, 升6降2;

8. 取离心后的中间白膜层 mL, 加生理盐水定容至50mL, 颠倒混匀, 离心机(  XW016  XW026 )930·g, 10 min, 升9降9;

9. 弃去上清, 细胞合管, 生理盐水重悬细胞, 定容50mL, 混匀后计数  *108个, 离心机(  XW016  XW026 )720·g, 8 min, 升9降9;

10. 弃去上清, 生理盐水定容50mL, 离心机(  XW016  XW026 )720·g, 8 min, 升9降9;

11. 离心结束后消毒离心管, 放入生物安全柜中, 根据需求进行冻存或细胞培养.

12. 对应细胞培养编号为:  ; 对应细胞冻存编号为:  .

细胞后续培养用途  
后续培养编号  
清场 未使用完试剂是否放入指定位置  是  否
废液是否进行收集处理  是  否
是否清洁, 消毒操作间  是  否 是否清洁, 消毒生物安全柜与移液枪  是  否
备注  
操作人/日期: 复核人/日期: 主管/日期: