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外周PBMC分离操作记录 | 文件编码: SOP-SC-011-E01 |
| 版 本 号: 01 |
| 工序: 外周血PBMC分离 | 记录编号 | ||||||||||
| 细胞批号 | 日期 | ||||||||||
| 试剂 | 名称 | 生产厂家 | 批号 | 使用数量 | |||||||
| 外周血 | / | ||||||||||
| 生理盐水 | |||||||||||
| 淋巴细胞分离液 | |||||||||||
| 仪器 设备 |
生物安全柜:
XW015
XW022
其他
离心机:
XW016
XW026
其他
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| 外周血 PBMC分离 |
1. 样本来源: 接收的外周血物料编码 . 采集时间: 24h内 超过24h; 入库编码: ; 2. 紫外灯照射30min; 3. 血液总量 mL, 分成 个50mL离心管进行处理; 4. 使用离心机( XW016 XW026 )650·g, 5 min, 升9降9, 结束后收集上清, 56℃水浴30min, 使用离心机( XW016 XW026 )3000·g, 10 min, 取上清-20℃保存. 5. 用生理盐水将下层溶液补至50mL; 6. 铺血: 将混匀并稀释的外周血缓慢并小心地加到提前准备好的 mL, 管分离液中. 7. 离心机( XW016 XW026 )1200·g, 25 min, 升6降2; 8. 取离心后的中间白膜层 mL, 加生理盐水定容至50mL, 颠倒混匀, 离心机( XW016 XW026 )930·g, 10 min, 升9降9; 9. 弃去上清, 细胞合管, 生理盐水重悬细胞, 定容50mL, 混匀后计数 *108个, 离心机( XW016 XW026 )720·g, 8 min, 升9降9; 10. 弃去上清, 生理盐水定容50mL, 离心机( XW016 XW026 )720·g, 8 min, 升9降9; 11. 离心结束后消毒离心管, 放入生物安全柜中, 根据需求进行冻存或细胞培养. 12. 对应细胞培养编号为: ; 对应细胞冻存编号为: . |
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| 细胞后续培养用途 | |||||||||||
| 后续培养编号 | |||||||||||
| 清场 | 未使用完试剂是否放入指定位置 | 是 否 | |||||||||
| 废液是否进行收集处理 | 是 否 | ||||||||||
| 是否清洁, 消毒操作间 | 是 否 | 是否清洁, 消毒生物安全柜与移液枪 | 是 否 | ||||||||
| 备注 | |||||||||||
| 操作人/日期: | 复核人/日期: | 主管/日期: | |||||||||